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编号:13612222
紫甘蓝提取液对人乳腺癌细胞生长和迁移的抑制作用(2)
http://www.100md.com 2017年6月1日 《世界中医药》 201711
     用含10%胎牛血清的RPMI1640细胞培养液常规培养MCF7细胞,当细胞生长至80%~90%致密单层时,消化细胞并制备细胞悬液,将1×105个/mL浓度的细胞悬液接种于96孔培养板中,置于37 ℃,5%CO2培养箱中预培养24 h后,分别加入不同浓度的PCE,使最终每组含PCE浓度分别为50、100、150、200、250、300 μg/L,并设空白对照组、正常对照组和STS(浓度250 nmol/L)对照组,继续培养24 h,于倒置相差显微镜下观察细胞形态。分别于12、24、36 h 3个时相进行MTT比色:弃旧培养液,洗涤细胞后,每孔加入5 mg/mL的MTT溶液20 μL,继续培养4 h,弃上清液,每孔加入150 μL二甲基亚砜(DMSO),振荡10 min使蓝紫色的结晶物充分溶解,在酶联免疫检测仪上选择490 nm波长,以空白对照孔调零,测定各个孔的吸光度(A)值。按公式“(1-药物组A值/正常对照组A值)×100%”计算细胞抑制率,每组设置6个复孔,进行3次重复实验,求其平均值,以剂量和生长抑制率做直线相关分析。

    將MCF7细胞以1×105个/mL浓度接种于6孔板中,置于37 ℃、5%CO2培养箱中培养24 h后,分别加入终浓度为150、200、250、300 μg/L的PCE ......
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