2.7 Fura-2 AM双波长荧光法测定细胞内钙离子浓度[15] 神经细胞经药物处理24 h后，用胰蛋白酶消化并收集细胞悬液，加入Fura-2 AM(终浓度为5 μmol·L-1)于37 ℃恒温培养箱中振荡30 min，2 000 r·min-1离心5 min，用Hanks 清洗2次后混悬。采用荧光分光光度计(RF-5000型，日本岛津)进行荧光测定，Fura-2及其与Ca2+结合后的复合物的最大激发波长分别为380，340 nm，发射波长为500 nm，这种变化可指示Ca2+的存在及其浓度。

    其中，R是实验中观察到的荧光比值(F340/F380)；37 ℃时Kd为224 nmol·L-1；Rmax为神经细胞加入0.09% Triton X-100透化后测得的F340/F380，Fs为神经细胞加入0.09% Triton X-100透化后在380 nm激发光下测得的Fura-2荧光强度(F380)，Rmin为神经细胞加入Triton X-100 透化后再加入EGTA(终浓度为3 mmol·L-1)的F340/F380，F0为神经细胞加入Triton X-100透化后再加入EGTA后在380 nm激发光下测得的荧光强度(F380) ......