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编号:13133282
川芎嗪对泡沫细胞胆固醇逆转运的影响(2)
http://www.100md.com 2014年4月1日 《中国中药杂志》 2014年第7期
     1.7Western blot检测PPARγ, LXRα, ABCA1蛋白质的表达 收集各组细胞,用预冷的PBS缓冲液清洗3~5次,按照细胞膜蛋白抽提试剂盒提取膜蛋白,并用BCA蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。20 μg膜蛋白样品与上样缓冲液按比例混合后煮沸5 min,SDS-PAGE电泳80 V恒压2 h,WB湿转(0.45 μm的PVDF膜)200 mA恒流2 h,5%脱脂牛奶室温封闭2 h,TBST漂洗3次后分别加入一抗(1∶200稀释)和β-actin(1∶300稀释)4 ℃孵育过夜,TBST漂洗3次,于37 ℃二抗(1∶1 000稀释)反应2 h后进行ECL显色。以β-actin作为内参,计算各处理组目的蛋白的表达。

    1.8统计学处理 实验数据以±s表示,采用SPSS 10.0统计软件分析数据,并采用双尾t检验进行统计学意义评估。

    2结果

    2.1川芎嗪对RAW264.7细胞源泡沫细胞增殖的影响 不同浓度的川芎嗪与RAW264.7细胞源泡沫细胞共培养24 h后,用MTT法测定细胞的活性 ......
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